Una vacuna de ARNm contra el SARS-CoV-2 – Informe preliminar

MÉTODOS
REALIZAMOS UN ENSAYO ABIERTO DE FASE 1, AUMENTO DE LA DOSIS, QUE INCLUYÓ A 45 ADULTOS SANOS, DE 18 A 55 AÑOS DE EDAD, QUE RECIBIERON DOS VACUNAS, CON 28 DÍAS DE DIFERENCIA, CON ARNM-1273 EN UNA DOSIS DE 25 ΜG, 100 ΜG O 250 ΜG. HUBO 15 PARTICIPANTES EN CADA GRUPO DE DOSIS.
DISEÑO DE PRUEBA Y PARTICIPANTES

Llevamos a cabo un ensayo clínico abierto de fase 1, de escalada de dosis, diseñado para determinar la seguridad, la reactogenicidad y la inmunogenicidad del ARNm-1273. Los participantes elegibles eran adultos sanos de 18 a 55 años de edad que recibieron dos inyecciones de la vacuna de prueba con 28 días de diferencia a una dosis de 25 μg, 100 μg o 250 μg. Sobre la base de los resultados obtenidos en pacientes con estos niveles de dosis, se agregaron grupos adicionales al protocolo; esos resultados se informarán en una publicación posterior. Los participantes no fueron evaluados para la infección por SARS-CoV-2 por serología o reacción en cadena de la polimerasa antes de la inscripción.»
SEGURIDAD DE LA VACUNA

Después de la primera vacunación, 5 participantes (33%) en el grupo de 25 μg informaron eventos adversos sistémicos solicitados, 10 (67%) en el grupo de 100 μg y 8 (53%) en el grupo de 250 μg; todos fueron de gravedad leve o moderada ( Figura 1 y Tabla S2). Los eventos adversos sistémicos solicitados fueron más comunes después de la segunda vacunación y ocurrieron en 7 de 13 participantes (54%) en el grupo de 25 μg, los 15 en el grupo de 100 μg y los 14 en el grupo de 250 μg, con 3 de esos participantes (21%) informaron uno o más eventos graves. »

 


 

NOTA: Como se ve, se requerirían al menos dos dosis, y se informan como positivos y se evalúa en forma conjunta la seguridad, la reactogencidad y la inmunogenicidad, situación altamente discturible. Y tampoco se evaluó su exposición previa al virus por lo cual lo que se midió podría no ser por la vacuna sino por esa exposición que no se evaluó. Por otro lado, la población no es la particularmente sensible al virus por lo cual la «seguridad» que se evalúa es dudosamente reproducible en ancianos.

Y se está midiendo «resultados» en grupos de 15 sujetos, con una variabilidad imposible de ponderar apenas para otra cosa que la seguridad,  y ya en el primer grupo (de menos dosis) informó eventos adversos sistémicos en la tercera parte de sus integrantes.

Así empezamos. generando expectativas que son absolutamente desmedidas, lo cual después hace muy complicado bajarlas.

 


Lisa A. Jackson, MD, MPH, Evan J. Anderson, MD, Nadine G. Rouphael, MD, Paul C. Roberts, Ph.D., Mamodikoe Makhene, MD, MPH, Rhea N. Coler, Ph.D., Michele P. McCullough, MPH, James D. happell, MD, Ph.D., Mark R. Denison, MD, Laura J. Stevens, MS, Andrea J. Pruijssers, Ph.D., Adrian McDermott, Ph.D., para el grupo de estudio mRNA-1273 *

Resumen

ANTECEDENTES

El coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo (SARS-CoV-2) surgió a fines de 2019 y se extendió a nivel mundial, lo que provocó un esfuerzo internacional para acelerar el desarrollo de una vacuna. La vacuna candidata mRNA-1273 codifica la proteína de pico de SARS-CoV-2 de prefusión estabilizada.

MÉTODOS

Realizamos un ensayo abierto de fase 1, aumento de la dosis, que incluyó a 45 adultos sanos, de 18 a 55 años de edad, que recibieron dos vacunas, con 28 días de diferencia, con ARNm-1273 en una dosis de 25 μg, 100 μg o 250 μg. Hubo 15 participantes en cada grupo de dosis.

RESULTADOS

Después de la primera vacunación, las respuestas de los anticuerpos fueron más altas con dosis más altas (día 29 ensayo inmunosorbente ligado a enzimas anti-S-2P título medio geométrico [GMT], 40,227 en el grupo de 25 μg, 109,209 en el grupo de 100 μg, y 213,526 en el grupo de 250 μg). Después de la segunda vacunación, los títulos aumentaron (día 57 GMT, 299,751, 782,719 y 1,192,154, respectivamente). Después de la segunda vacunación, se detectó la actividad neutralizadora del suero mediante dos métodos en todos los participantes evaluados, con valores generalmente similares a los de la mitad superior de la distribución de un panel de muestras de suero de control convalecientes. Los eventos adversos solicitados que ocurrieron en más de la mitad de los participantes incluyeron fatiga, escalofríos, dolor de cabeza, mialgia y dolor en el lugar de la inyección. Los eventos adversos sistémicos fueron más comunes después de la segunda vacunación,

CONCLUSIONES

La vacuna mRNA-1273 indujo respuestas inmunitarias anti-SARS-CoV-2 en todos los participantes, y no se identificaron problemas de seguridad limitantes de los ensayos. Estos hallazgos apoyan un mayor desarrollo de esta vacuna. (Financiado por el Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas y otros; mRNA-1273 ClinicalTrials.gov number, NCT04283461. se abre en una pestaña nueva)

El coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo (SARS-CoV-2) surgió en diciembre de 2019 y se propagó a nivel mundial, causando una pandemia de enfermedad respiratoria denominada enfermedad por coronavirus 2019 (Covid-19). 1 La necesidad urgente de vacunas provocó una respuesta internacional, con más de 120 vacunas candidatas al SARS-CoV-2 en desarrollo dentro de los primeros 5 meses de 2020. 2 La vacuna candidata mRNA-1273 es un mensajero modificado con nucleósidos encapsulado en nanopartículas lipídicas Vacuna basada en ARN (ARNm) que codifica la glucoproteína de la espiga (S) del SARS-CoV-2 estabilizada en su conformación de prefusión. La glucoproteína S media en la unión de la célula huésped y es necesaria para la entrada viral 3 ; Es el objetivo principal de la vacuna para muchas vacunas candidatas para el SARS-CoV-2. 4-7

Realizamos el primer ensayo clínico de fase 1 en humanos en adultos sanos para evaluar la seguridad e inmunogenicidad del ARNm-1273. Aquí informamos los resultados provisionales de la prueba.

Métodos

DISEÑO DE PRUEBA Y PARTICIPANTES

Llevamos a cabo un ensayo clínico abierto de fase 1, de escalada de dosis, diseñado para determinar la seguridad, la reactogenicidad y la inmunogenicidad del ARNm-1273. Los participantes elegibles eran adultos sanos de 18 a 55 años de edad que recibieron dos inyecciones de la vacuna de prueba con 28 días de diferencia a una dosis de 25 μg, 100 μg o 250 μg. Sobre la base de los resultados obtenidos en pacientes con estos niveles de dosis, se agregaron grupos adicionales al protocolo; esos resultados se informarán en una publicación posterior. Los participantes no fueron evaluados para la infección por SARS-CoV-2 por serología o reacción en cadena de la polimerasa antes de la inscripción. El ensayo se realizó en el Kaiser Permanente Washington Health Research Institute en Seattle y en la Facultad de Medicina de la Universidad Emory en Atlanta. El protocolo, disponible con el texto completo de este artículo en NEJM.org, permitió análisis provisionales para informar las decisiones con respecto a la estrategia de la vacuna y la salud pública; Este análisis intermedio informa los hallazgos hasta el día 57. Los detalles completos del diseño, la conducta, la supervisión y los análisis del ensayo se pueden encontrar en el protocolo y el plan de análisis estadístico (disponible en NEJM.org).

El ensayo fue revisado y aprobado por la junta de revisión institucional de Advarra, que funcionó como una junta única y fue supervisado por un comité de monitoreo de seguridad independiente. Todos los participantes dieron su consentimiento informado por escrito antes de la inscripción. El ensayo se realizó bajo una solicitud de Investigación de nuevos medicamentos presentada a la Administración de Alimentos y Medicamentos. La vacuna fue desarrollada por investigadores del Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas (NIAID, el patrocinador del ensayo) y en Moderna (Cambridge, MA). Moderna participó en las discusiones sobre el diseño del ensayo, proporcionó el candidato a vacuna y, como parte del grupo de redacción, contribuyó a la redacción del manuscrito. The Emmes Company, como subcontratista del NIAID, sirvió como centro de coordinación estadística y de datos, desarrolló el plan de análisis estadístico, y realizó los análisis. El manuscrito fue escrito en su totalidad por los autores, con el primer autor como autor principal general, el cuarto autor como autor principal del NIAID y los dos últimos autores como autores principales (los detalles se proporcionan en elApéndice suplementario , disponible en NEJM.org). Los autores tuvieron acceso completo a los informes de datos, que fueron preparados a partir de los datos sin procesar por el centro de coordinación estadística y de datos, y avalan la integridad y precisión de los datos y la fidelidad del ensayo al protocolo.

VACUNA

La vacuna candidata mRNA-1273, fabricada por Moderna, codifica el antígeno S-2P, que consiste en la glucoproteína SARS-CoV-2 con un anclaje transmembrana y un sitio de escisión S1-S2 intacto. S-2P se estabiliza en su conformación de prefusión mediante dos sustituciones consecutivas de prolina en las posiciones de aminoácidos 986 y 987, en la parte superior de la hélice central en la subunidad S2. 8 La cápsula de nanopartículas lipídicas compuesta de cuatro lípidos se formuló en una proporción fija de ARNm y lípidos. La vacuna de ARNm-1273 se proporcionó como un líquido estéril para inyección a una concentración de 0,5 mg por mililitro. Se usó solución salina normal como diluyente para preparar las dosis administradas.

PROCEDIMIENTOS DE PRUEBA

La vacuna se administró como una inyección de 0,5 ml en el músculo deltoides los días 1 y 29; Las visitas de seguimiento se programaron para 7 y 14 días después de cada vacunación y en los días 57, 119, 209 y 394. El plan de aumento de la dosis especificó la inscripción de cuatro participantes centinelas en el grupo de 25 μg, seguido de cuatro participantes centinelas en el grupo de 100 μg, seguido de la inscripción completa de esos dos grupos de dosis. Si no se cumplieron las reglas de detención después de que todos los participantes en esos dos grupos de dosis completaron el día 8, se inscribieron cuatro participantes centinelas en el grupo de 250 μg, seguidos por el resto de ese grupo de dosis.

Los participantes registraron reacciones locales y sistémicas, utilizando una ayuda de memoria, durante 7 días después de cada vacunación. Los participantes no recibieron instrucciones de usar habitualmente acetaminofén u otros analgésicos o antipiréticos antes o después de las vacunas, pero se les pidió que registraran cualquier medicamento nuevo tomado. Los eventos adversos se clasificaron de acuerdo con una escala de clasificación de toxicidad estándar (Tabla S1 en el Apéndice complementario). 9

EVALUACIÓN DE ANTICUERPOS VINCULANTES DE SARS-COV-2 Y RESPUESTAS NEUTRALIZANTES

Las respuestas de anticuerpos de unión contra S-2P y el dominio de unión al receptor aislado, ubicado en la subunidad S1, se evaluaron mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). La actividad neutralizante inducida por la vacuna se evaluó mediante un ensayo de neutralización de una ronda de infección por un seudotipado informador de lentivirus (PsVNA) y mediante un ensayo de neutralización de placa de SARS-CoV-2 de tipo salvaje vivo (PRNT). ELISA y PsVNA se realizaron en muestras recolectadas de todos los participantes en los días 1, 15, 29, 36, 43 y 57. Debido a la naturaleza intensiva en tiempo del ensayo PRNT, para este informe del análisis intermedio, los resultados solo estaban disponibles para el día 1 y el día 43 puntos temporales en los grupos de dosis de 25 μg y 100 μg.

Para comparar las respuestas inmunitarias de los participantes con las inducidas por la infección por SARS-CoV-2, también se analizaron 41 muestras de suero convalecientes. Los ensayos se realizaron en el Centro de Investigación de Vacunas del NIAID (ELISA y PsVNA) y en el Centro Médico de la Universidad de Vanderbilt (PRNT).

EVALUACIÓN DE LAS RESPUESTAS DE CÉLULAS T SARS-COV-2

Las respuestas de las células T contra la proteína espiga se evaluaron mediante un ensayo de tinción de citocinas intracelulares, realizado en muestras recolectadas en los días 1, 29 y 43. Para este informe del análisis intermedio, los resultados estaban disponibles solo para los 25 μg y 100 -μg grupos de dosis. Estos ensayos se realizaron en el Centro de Investigación de Vacunas del NIAID. (Consulte el Apéndice complementario para obtener detalles de todos los métodos de ensayo y las características de las muestras de suero convalecientes).

ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Los resultados de las pruebas de inmunogenicidad de los 45 participantes inscritos excluyeron los hallazgos para el día 36, ​​el día 43 y el día 57 para 3 participantes que no recibieron la segunda vacuna y para los puntos temporales en los que no se recolectaron muestras (en el grupo de 100 μg: 1 participante en el día 43 y día 57; en el grupo de 250 μg: 1 participante en el día 29 y 1 en el día 57). Los intervalos de confianza de las medias geométricas se calcularon con la distribución t de Student en datos transformados logarítmicamente. La seroconversión medida por ELISA se definió como un aumento por un factor de 4 o más en el título de anticuerpos sobre la línea de base.

Resultados

POBLACIÓN DE PRUEBA

Características de los participantes en el ensayo mRNA-1273 en la inscripción.

Los 45 participantes inscritos recibieron su primera vacuna entre el 16 de marzo y el 14 de abril de 2020 (Fig. S1). Tres participantes no recibieron la segunda vacuna, incluido uno en el grupo de 25 μg que tenía urticaria en ambas piernas, con inicio 5 días después de la primera vacunación, y dos (uno en el grupo de 25 μg y otro en el de 250 μg grupo) que se perdió la segunda ventana de vacunación debido al aislamiento de la sospecha de Covid-19, mientras que los resultados de la prueba, en última instancia negativos, estaban pendientes. Todos continuaron asistiendo a visitas de prueba programadas. Las características demográficas de los participantes en la inscripción se proporcionan en la Tabla 1 .

SEGURIDAD DE LA VACUNA

No se observaron eventos adversos graves y no se cumplieron las reglas de detención de ensayos previamente especificadas. Como se señaló anteriormente, un participante en el grupo de 25 μg se retiró debido a un evento adverso no solicitado, urticaria transitoria, que se consideró que estaba relacionado con la primera vacuna.

Eventos adversos sistémicos y locales.

Después de la primera vacunación, 5 participantes (33%) en el grupo de 25 μg informaron eventos adversos sistémicos solicitados, 10 (67%) en el grupo de 100 μg y 8 (53%) en el grupo de 250 μg; todos fueron de gravedad leve o moderada ( Figura 1 y Tabla S2). Los eventos adversos sistémicos solicitados fueron más comunes después de la segunda vacunación y ocurrieron en 7 de 13 participantes (54%) en el grupo de 25 μg, los 15 en el grupo de 100 μg y los 14 en el grupo de 250 μg, con 3 de esos participantes (21%) informaron uno o más eventos graves.

Ninguno de los participantes tuvo fiebre después de la primera vacunación. Después de la segunda vacunación, ningún participante en el grupo de 25 μg, 6 (40%) en el grupo de 100 μg y 8 (57%) en el grupo de 250 μg informaron fiebre; Uno de los eventos (temperatura máxima, 39,6 ° C) en el grupo de 250 μg se calificó como grave. (En el apéndice complementario se proporcionan detalles adicionales sobre los eventos adversos para ese participante ).

Los eventos adversos locales, cuando estuvieron presentes, fueron casi todos leves o moderados, y el dolor en el lugar de la inyección fue común. En ambas vacunas, los eventos adversos sistémicos y locales solicitados que ocurrieron en más de la mitad de los participantes incluyeron fatiga, escalofríos, dolor de cabeza, mialgia y dolor en el lugar de la inyección. La evaluación de los valores de seguridad del laboratorio clínico de grado 2 o superior y los eventos adversos no solicitados no revelaron patrones de preocupación ( Anexo complementario y Tabla S3).

RESPUESTAS DE ANTICUERPOS DE UNIÓN AL SARS-COV-2

Respuestas del ensayo de inmunogenicidad humoral media geométrica al ARNm-1273 en participantes y en muestras de suero convaleciente.SARS-CoV-2 Anticuerpo y respuestas de neutralización.

La unión de títulos medios geométricos de IgG de anticuerpos (GMT) a S-2P aumentó rápidamente después de la primera vacunación, con seroconversión en todos los participantes en el día 15 ( Tabla 2 y Figura 2A ). Las respuestas dependientes de la dosis a la primera y segunda vacunación fueron evidentes. Las respuestas de anticuerpos específicos del dominio de unión al receptor fueron similares en patrón y magnitud ( Figura 2B) Para ambos ensayos, la magnitud media de las respuestas de anticuerpos después de la primera vacunación en los grupos de dosis de 100 μg y 250 μg fue similar a la magnitud media en muestras de suero convalecientes, y en todos los grupos de dosis la magnitud media después de la segunda vacunación fue el cuartil superior de valores en las muestras de suero convalecientes. Los GMT de ELISA S-2P en el día 57 (299,751 [intervalo de confianza del 95% {IC}, 206,071 a 436,020] en el grupo de 25 μg, 782,719 [IC del 95%, 619,310 a 989,244] en el grupo de 100 μg, y 1,192,154 [IC del 95%, 924.878 a 1.536.669] en el grupo de 250 μg) excedió el de las muestras de suero convalecientes (142.140 [IC del 95%, 81.543 a 247.768]).

RESPUESTAS DE NEUTRALIZACIÓN DEL SARS-COV-2

Ningún participante tenía respuestas detectables de PsVNA antes de la vacunación. Después de la primera vacunación, se detectaron respuestas de PsVNA en menos de la mitad de los participantes, y se observó un efecto de dosis (dilución inhibitoria del 50% [ID 50 ]: Figura 2C , Fig. S8 y Tabla 2 ; dilución inhibitoria del 80% [ID 80 ]: Fig. S2 y Tabla S6). Sin embargo, después de la segunda vacunación, se identificaron respuestas de PsVNA en muestras de suero de todos los participantes. Las respuestas más bajas fueron en el grupo de dosis de 25 μg, con una ID 50 geométrica media de 112.3 (IC 95%, 71.2 a 177.1) en el día 43; las respuestas más altas en los grupos de 100 μg y 250 μg fueron similares en magnitud (media geométrica ID 50, 343.8 [IC 95%, 261.2 a 452.7] y 332.2 [IC 95%, 266.3 a 414.5], respectivamente, en el día 43). Estas respuestas fueron similares a los valores en la mitad superior de la distribución de valores para muestras de suero convalecientes.

Antes de la vacunación, ningún participante tenía un 80% de neutralización de virus vivos detectable a la concentración sérica más alta probada (dilución 1: 8) en el ensayo PRNT. En el día 43, se detectó actividad neutralizante de virus de tipo salvaje capaz de reducir la infectividad del SARS-CoV-2 en un 80% o más (PRNT 80 ) en todos los participantes, con respuestas geométricas promedio de PRNT 80 de 339.7 (IC 95%, 184.0 a 627.1) en el grupo de 25 μg y 654.3 (IC 95%, 460.1 a 930.5) en el grupo de 100 μg ( Figura 2D ). PRNT 80 neutralizantelas respuestas promedio fueron generalmente iguales o superiores a los valores de las tres muestras de suero convalecientes probadas en este ensayo. Se observó un buen acuerdo dentro y entre los valores de los ensayos de unión para S-2P y el dominio de unión al receptor y la actividad neutralizante medida por PsVNA y PRNT (Figs. S3 a S7), que proporciona soporte ortogonal para cada ensayo en la caracterización de la respuesta humoral inducida por ARNm-1273.

RESPUESTAS DE CÉLULAS T SARS-COV-2

Las dosis de 25 μg y 100 μg provocaron respuestas de células T CD4 (Figs. S9 y S10) que en la estimulación por agrupaciones de péptidos específicos de S fueron fuertemente sesgadas hacia la expresión de citocinas Th1 (factor de necrosis tumoral α> interleucina 2> interferón γ ), con una expresión mínima de citocinas de células T auxiliares de tipo 2 (Th2) (interleucina 4 e interleucina 13). Las respuestas de las células T CD8 a S-2P se detectaron a niveles bajos después de la segunda vacunación en el grupo de dosis de 100 μg (Fig. S11).

Discusión

Reportamos hallazgos provisionales de este ensayo clínico de fase 1 de la vacuna mRNA-1273 SARS-CoV-2 que codifica un trímero de espiga de prefusión estabilizado, S-2P. La experiencia con la plataforma de ARNm para otras vacunas candidatas y la fabricación rápida permitieron el despliegue de la primera vacuna clínica humana candidata en tiempo récord. Procesos de desarrollo de productos que normalmente requieren años 10se terminaron en unos 2 meses. El desarrollo de la vacuna se inició después de que el genoma del SARS-CoV-2 fuera publicado el 10 de enero de 2020; la fabricación y entrega del material de los ensayos clínicos se completó dentro de los 45 días, y los primeros participantes del ensayo fueron vacunados el 16 de marzo de 2020, solo 66 días después de la publicación de la secuencia genómica del virus. La línea de tiempo acelerada generó datos provisionales clave necesarios para lanzar ensayos clínicos avanzados a gran escala dentro de los 6 meses posteriores a la conciencia inicial de una nueva amenaza de pandemia.

La serie de vacunas de dos dosis fue generalmente sin toxicidad grave; Los eventos adversos sistémicos después de la primera vacunación, cuando se informaron, se calificaron todos como leves o moderados. Mayor reactogenicidad siguió a la segunda vacunación, particularmente en el grupo de 250 μg. En los tres grupos de dosis, las reacciones locales en el sitio de inyección fueron principalmente leves. Este perfil de seguridad descriptivo es similar al descrito en un informe de dos ensayos de vacunas de ARNm de influenza aviar (influenza A / H10N8 y influenza A / H7N9) que fueron fabricadas por Moderna con el uso de una formulación anterior de cápsula de nanopartículas lipídicas 11 y es consistente con un informe provisional de una evaluación de fase 1–2 de una vacuna de ARNm Covid-19 que codifica el dominio de unión al receptor S. 6 6Esos estudios mostraron que los eventos adversos sistémicos solicitados tendían a ser más frecuentes y más severos con dosis más altas y después de la segunda vacunación.

La vacuna mRNA-1273 fue inmunogénica, induciendo respuestas de anticuerpos de unión robusta tanto a S-2P de longitud completa como al dominio de unión al receptor en todos los participantes después de la primera vacunación de una manera dependiente del tiempo y la dosis. Respuestas de anticuerpos neutralizantes proporcionalmente altas también se obtuvieron de una manera dependiente de la dosis. La seroconversión fue rápida para la unión de anticuerpos, ocurriendo dentro de las 2 semanas posteriores a la primera vacunación, pero la actividad neutralizadora de pseudovirus fue baja antes de la segunda vacunación, lo que respalda la necesidad de un programa de vacunación de dos dosis. Es importante tener en cuenta que los títulos de anticuerpos de unión y neutralización inducidos por el esquema de dos dosis fueron similares a los encontrados en muestras de suero convalecientes. Sin embargo,12,13

Aunque aún no se han determinado los correlatos de protección contra la infección por SARS-CoV-2, se ha demostrado que la medición de la actividad neutralizante del suero es un correlato mecanicista de protección para otros virus respiratorios, como la influenza 14 y el virus sincitial respiratorio, 15 y generalmente es aceptado como un biomarcador funcional de la respuesta humoral in vivo. 16 En los macacos rhesus que recibieron candidatos a vacunas de ADN que expresan diferentes formas de la proteína de la punta del SARS-CoV-2, los títulos de anticuerpos neutralizantes posteriores a la vacunación se correlacionaron con la protección contra el desafío del SARS-CoV-2. 17 Las respuestas inmunes humorales y mediadas por células se han asociado con la protección inducida por la vacuna contra el desafío 18o posterior reexposición después de la infección por SARS-CoV-2 en un modelo de macaco rhesus. 19 Encontramos fuertes correlaciones entre los ensayos de unión y neutralización y entre los ensayos de neutralización de virus vivos y pseudovirus. El último hallazgo sugiere que el ensayo de neutralización de pseudovirus, realizado bajo contención de bioseguridad de nivel 2, puede, cuando se valida, servir como un sustituto relevante para la neutralización de virus vivos, que requiere contención de bioseguridad de nivel 3. En humanos, los ensayos de eficacia de fase 3 permitirán evaluar la correlación de las respuestas inmunes inducidas por la vacuna con la protección clínica.

En este informe provisional de seguimiento de los participantes hasta el día 57, no pudimos evaluar la durabilidad de las respuestas inmunes; sin embargo, los participantes serán seguidos durante 1 año después de la segunda vacunación con recolecciones de sangre programadas durante ese período para caracterizar las respuestas inmunológicas humorales y celulares. Esta evaluación longitudinal es relevante dado que los estudios de historia natural sugieren que las infecciones por SARS-CoV y MERS-CoV (síndrome de coronavirus del síndrome respiratorio del Medio Oriente), particularmente enfermedades leves, pueden no generar respuestas de anticuerpos de larga duración. 20-22

El perfil de inmunogenicidad rápido y robusto de la vacuna mRNA-1273 probablemente sea el resultado de un diseño innovador de antígeno de vacuna basado en la estructura, 23 junto con un potente sistema de administración de nanopartículas lipídicas, y el uso de nucleótidos modificados que evitan la activación intracelular temprana del interferón. genes asociados Estas características de la composición y formulación de ARNm se han asociado con la expresión prolongada de proteínas, la inducción de células auxiliares foliculares T específicas de antígeno y la activación de células B del centro germinal. 24La estabilización de las proteínas de la punta del coronavirus mediante la sustitución de dos prolina en la parte superior de la repetición 1 de heptad evita los reordenamientos estructurales de la subunidad de fusión (S2). Esto ha permitido la determinación de la estructura a nivel atómico para la conformación previa a la fusión del pico de cepas endémicas y pandémicas, incluyendo HKU1, 25 SARS-CoV, 26 y MERS-CoV. 27 Además, la estabilidad conformacional S-2P se traduce en una mayor inmunogenicidad, 27-29 basada en la preservación de epítopos sensibles a la neutralización en el vértice de la molécula de prefusión, como se muestra para la glucoproteína F del virus sincitial respiratorio, 30y una expresión de proteína mejorada, 27lo cual es particularmente ventajoso para el suministro de antígeno basado en genes. Por lo tanto, la presentación de la conformación de prefusión plegada naturalmente de la glicoproteína S al sistema inmune a partir de una plantilla de ARNm permite una producción eficiente de antígeno dentro del huésped y promueve respuestas de anticuerpos de alta calidad y alta magnitud al SARS-CoV-2.

La experiencia previa con vacunas veterinarias contra el coronavirus y modelos animales de infección por SARS-CoV y MERS-CoV han planteado preocupaciones de seguridad sobre el potencial de enfermedad respiratoria mejorada asociada a la vacuna. Estos eventos se asociaron con coronavirus trópicos macrófagos susceptibles a la mejora de la replicación dependiente de anticuerpos o con antígenos de vacunas que inducían anticuerpos con poca actividad neutralizante y respuestas sesgadas a Th2. 31La reducción del riesgo de enfermedad respiratoria mejorada asociada a la vacuna o la mejora de la replicación dependiente de anticuerpos implica la inducción de respuestas de anticuerpos funcionales de alta calidad y respuestas de células T sesgadas Th1. Los estudios de ARNm-1273 en ratones muestran que el antígeno de pico estructuralmente definido induce una actividad neutralizadora robusta y que el suministro basado en genes promueve respuestas sesgadas por Th1, incluidas las células T CD8 que protegen contra la replicación del virus en el pulmón y la nariz sin evidencia de inmunopatología. 32 Es importante tener en cuenta que el ARNm-1273 también induce respuestas de células T CD4 sesgadas por Th1 en humanos. Las pruebas adicionales en animales y el análisis continuo de células T de muestras clínicas continuarán definiendo el perfil de seguridad del ARNm-1273.

Estos hallazgos de seguridad e inmunogenicidad respaldan el avance de la vacuna mRNA-1273 a ensayos clínicos en etapas posteriores. De las tres dosis evaluadas, la dosis de 100 μg provoca respuestas de alta neutralización y respuestas de células T CD4 sesgadas Th1, junto con un perfil de reactogenicidad que es más favorable que el de la dosis más alta. Un ensayo de fase 2 de ARNm-1273 en 600 adultos sanos, que evalúa dosis de 50 μg y 100 μg, está en curso (número de ClinicalTrials.gov, NCT04405076. se abre en una pestaña nueva) Se espera que comience un gran ensayo de eficacia de fase 3, que se espera evalúe una dosis de 100 μg, durante el verano de 2020.

Apoyado por el NIAID, National Institutes of Health (NIH), Bethesda, con los números de premio UM1AI148373 (Kaiser Washington), UM1AI148576 (Emory University), UM1AI148684 (Emory University), UM1Al148684-01S1 (Vanderbilt University Medical Center), y HHSN272201500002C (HHSN272201500002C ( por elCentro Nacional para el Avance de las Ciencias Traslacionales, NIH, con el número de premio UL1 TR002243 (Vanderbilt University Medical Center); y por elFondo de Investigación Dolly Parton COVID-19(Centro Médico de la Universidad de Vanderbilt). La Coalición para la Innovación en Preparación para Epidemias (CEPI) proporcionó fondos para la fabricación del material de la fase 1 de ARNm-1273.

Los formularios de divulgación proporcionados por los autores están disponibles con el texto completo de este artículo en NEJM.org.

Los Dres. Graham y Beigel contribuyeron igualmente a este artículo.

El contenido de esta publicación no refleja necesariamente los puntos de vista o políticas del Departamento de Salud y Servicios Humanos, ni ninguna mención de nombres comerciales, productos comerciales u organizaciones implica aprobación por parte del gobierno de los Estados Unidos. Moderna proporcionó mRNA-1273 para su uso en este ensayo, pero no proporcionó ningún apoyo financiero. Los empleados de Moderna colaboraron en el desarrollo del protocolo, contribuyeron significativamente a la aplicación Investigational New Drug (IND) y participaron en las llamadas semanales del equipo de protocolo. El Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas (NIAID) finalmente tomó todas las decisiones con respecto al diseño y la implementación de los ensayos.

Este artículo fue publicado el 14 de julio de 2020 en NEJM.org.

Una declaración de intercambio de datos proporcionada por los autores está disponible con el texto completo de este artículo en NEJM.org.

Agradecemos a los miembros del Equipo de Estudio mRNA-1273 (ver el Apéndice Complementario) por sus numerosas e invaluables contribuciones, los miembros del comité de monitoreo de seguridad (Stanley Perlman, MD, Ph.D. [presidente], Universidad de Iowa; Gregory Gray, MD, MPH, Duke University; y Kawsar Talaat, MD, Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health) por su supervisión; Huihui Mu y Michael Farzan por proporcionar las células 293 que sobreexpresan ACE2; y Dominic Esposito, Ph.D., Director del Laboratorio de Expresión de Proteínas en el Laboratorio Nacional Frederick para la Investigación del Cáncer, por proporcionar la proteína S-2P para los ensayos inmunológicos. También agradecemos a los participantes por su altruismo y su dedicación a este juicio. El equipo de estudio de la Universidad de Emory agradece a Georgia Research Alliance y Children’s Healthcare of Atlanta por su apoyo. El equipo de estudio de Kaiser Washington agradece a Howard Crabtree, R. Ph.

afiliaciones de autor

Del Instituto de Investigación de Salud Kaiser Permanente de Washington (LAJ) y del Centro para la Investigación Global de Enfermedades Infecciosas (CGIDR), el Instituto de Investigación Infantil de Seattle (RNC), ambos en Seattle; el Departamento de Medicina, Centro de Infecciones y Vacunas Infantiles (CCIV) de Children’s Healthcare de Atlanta y el Departamento de Pediatría de la Universidad de Emory, Atlanta (EJA, EP), y Hope Clinic, Departamento de Medicina, Facultad de Medicina de la Universidad de Emory, Decatur (NGR , MPM) – ambos en Georgia; la División de Microbiología y Enfermedades Infecciosas (PCR, M. Makhene, WB, RP-T., JHB) y el Centro de Investigación de Vacunas (AM, BF, NAD-R., KSC, KMM, SO, SDS, PAS, MP, JRM, JEL, BSG), Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas (NIAID), Institutos Nacionales de Salud (NIH), Bethesda, la Facultad de Medicina de la Universidad de Maryland, Baltimore (KMN), y la Compañía Emmes, Rockville (M. Makowski, JA, KC), todas en Maryland; los Departamentos de Pediatría (JDC, MRD, LJS, AJP) y Patología, Microbiología e Inmunología (MRD), y el Instituto Vanderbilt de Infección, Inmunología e Inflamación (JDC, MRD, AJP), Vanderbilt University Medical Center, Nashville; y Moderna, Cambridge, MA (HB, WS).

Dirija las solicitudes de reimpresión al Dr. Jackson en el Kaiser Permanente Washington Health Research Institute, 1730 Minor Ave., Suite 1600, Seattle, WA 98101, o en  .

Los miembros del Grupo de Estudio mRNA-1273 se enumeran en el Apéndice Complementario , disponible en NEJM.org.

 

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